Гель электрофорезі ДНҚ талдауының молекулалық биологияда қолданылатын негізгі әдістерінің бірі болып табылады.Бұл әдіс ДНҚ фрагменттерінің гель арқылы көшуін қамтиды, онда олар өлшеміне немесе пішініне қарай бөлінеді.Дегенмен, электрофорез тәжірибелеріңіз кезінде, мысалы, агароздық гельдегі жағылған жолақтар немесе гельде жолақтардың болмауы сияқты қателерді кездестірдіңіз бе?Бұл қателердің себебі не болуы мүмкін?
Біздің техниктер анықтама үшін осы жерде ақауларды жою жұптарын қорытындылады.
1. Агарозды гельге жағылған жолақтар
●ДНҚ бұзылған.Нуклеазды ластанудан аулақ болыңыз.
● Электрофорез буфері жаңа емес.Электрофорез буферін бірнеше рет қолданғаннан кейін иондық беріктік төмендейді, ал оның рН мәні жоғарылайды, сондықтан буфер сыйымдылығы әлсірейді, бұл электрофорез әсеріне әсер етеді.Электрофорез буферін жиі ауыстыру ұсынылады.
● Дұрыс емес электрофорез жағдайлары қолданылды.Кернеудің 20 В/см-ден жоғары болуына жол бермеңіз және электрофорез кезінде температураны <30°C ұстаңыз.Үлкен ДНҚ тізбегі электрофорезі үшін температура <15° C болуы керек. Электрофорез буферінің буфер сыйымдылығы жеткілікті екенін тексеріңіз.
● Гельге тым көп ДНҚ жүктелген.ДНҚ мөлшерін азайтыңыз.
● ДНҚ-да тым көп тұз.Жетілдірілген артық тұздарды кетіру үшін этанол тұнбасын пайдаланыңыз.
● ДНҚ ақуызбен ластанған.Протеинді жою үшін фенол экстракциясын қолданыңыз.
● ДНҚ денатурацияланған.Электрофорезге дейін қыздыруға болмайды.ДНҚ-ны 20 мМ NaCl буферде сұйылтыңыз.
2. ДНҚ диапазонының миграциясының аномалиялары
● λHind III фрагментінің COS сайтының ренатурациясы.Электрофорезге дейін ДНҚ-ны 5 минут бойы 65 ° C-тан төмен қыздырыңыз, содан кейін оны мұз қондырғысында 5 минут суытыңыз.
● Дұрыс емес электрофорез жағдайлары қолданылды.Кернеудің 20 В/см-ден жоғары болуына жол бермеңіз және электрофорез кезінде температураны <30°C ұстаңыз.Электрофорез буферінің буфер сыйымдылығы жеткілікті екенін тексеріңіз.
● ДНҚ денатурацияланған.Электрофорезге дейін қыздыруға болмайды.ДНҚ-ны 20 мМ NaCl буферде сұйылтыңыз.
3. Агарозды гельде әлсіз немесе жоқ ДНҚ жолақтары
● Гельге жүктелген ДНҚ мөлшері немесе концентрациясы жеткіліксіз болды.ДНҚ мөлшерін көбейтіңіз.Полиакриламидті гель электрофорезі агарозды электрофорезге қарағанда біршама сезімтал және үлгі жүктемесін сәйкесінше азайтуға болады.
● ДНҚ бұзылған.Нуклеазды ластанудан аулақ болыңыз.
● ДНҚ гельден электрофорезденді.Гельді аз уақыт электрофоризациялаңыз, төменгі кернеуді пайдаланыңыз немесе жоғары пайыздық гельді пайдаланыңыз.
● Этидий бромидімен боялған ДНҚ визуализациясы үшін дұрыс емес W жарық көзі пайдаланылды.Үлкен сезімталдық үшін қысқа толқын ұзындығы (254 нм) Вт шамын пайдаланыңыз.
4. ДНҚ жолақтары жоқ
●Кішкентай өлшемді ДНҚ гельден электрофорезденді.Гельді аз уақыт электрофоризациялаңыз, төменгі кернеуді пайдаланыңыз немесе жоғары пайыздық гельді пайдаланыңыз.
● Ұқсас молекулалық ДНҚ жолақтарын ажырату қиын.Электрофорез уақытын көбейтіп, концентрацияны тексеріңізПайдаланылатын гельдің дұрыс пайызын тексеру үшін.
● ДНҚ денатурацияланған.Электрофорезге дейін қыздыруға болмайды.ДНҚ-ны 20 мМ NaCl буферде сұйылтыңыз.
● ДНҚ тізбегі үлкен, сондықтан әдеттегі гельдік электрофорез жарамайды.Импульстік гельдік электрофорез бойынша талдау.Агарозды гель электрофорезімен сізде тағы қандай мәселелер болды?Болашақта гидтер туралы көбірек зерттейтін боламыз.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) - Қытайдағы электрофорезге қатысты өнімдерге бағытталған мамандандырылған компания.Оның тарихы 1970 жылы Қытай реформалар мен ашықтық кезеңіне әлі кіріспеген кезде басталады.Жылдар бойы дамып келе жатқан Liuyi Bitotech өз брендіне ие, ол электрофорез өнімдерінің ішкі нарығында Liuyi бренді ретінде белгілі.
Liuyi брендінің Қытайда 50 жылдан астам тарихы бар және компания бүкіл әлем бойынша тұрақты және жоғары сапалы өнімдерді ұсына алады.Жылдар бойы даму арқылы ол сіздің таңдауыңызға лайық!
Liuyi Biotech көлденең электрофорез жасушалары (цистерналар/камералар) сыртқы түрі жақсы жоғары сапалы.Әр түрлі өлшемдегі гель науаларымен олар сіздің әртүрлі эксперименттік талаптарыңызды қанағаттандыра алады.Біздің жеке техникалық командамыз және зауытымыз бар.Дизайндан өндіріске, шикізаттан негізгі бөліктерге дейін біз бүкіл процесті басқара аламыз.DYCP 31 сериясы үлгі болып табылатын ДНҚ электрофорезіне арналғанDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, жәнеDYCP-31E.Олардың арасындағы айырмашылықтар гель мөлшері мен бағасы.Біз өз тұтынушыларымызға өнімдердің толық мөлшерін ұсынамыз.ҮлгіDYCP-32Cең үлкен гельді 250мм*250мм жасай алады.
Сонымен қатар, біз электрофорезді қуат көзімен қамтамасыз етуді ұсынамызDYY-6C,DYY-6DжәнеКҮН-10Сбіздің электрофорез жасушалары үшін (цистерналар/камералар) DYCP-31 және 32 сериялары.
Өнімдер туралы қосымша ақпарат алғыңыз келсе, қосымша ақпарат алу үшін осы веб-сайтқа кіріңіз және бізге не қажет екенін білу үшін электрондық пошта арқылы хабарласыңыз және сізге шешімдерді ұсына аламыз ба, соны біліңіз.
Біз туралы қосымша ақпарат алу үшін электрондық пошта арқылы бізге хабарласыңыз[электрондық пошта қорғалған], [электрондық пошта қорғалған].
Жіберу уақыты: 09 мамыр 2022 ж