Гельдік электрофорезді оңтайландыру: үлгі көлемі, кернеу және уақыт бойынша ең жақсы тәжірибелер

Кіріспе

Гель электрофорезі - белоктарды, нуклеин қышқылдарын және басқа макромолекулаларды бөлу үшін кеңінен қолданылатын молекулалық биологиядағы іргелі әдіс. Үлгі көлемін, кернеуді және электрофорез уақытын дұрыс бақылау дәл және қайталанатын нәтижелерге қол жеткізу үшін өте маңызды.Біздің зертханалық әріптесіміз ұсынадыSDS-PAGE гель электрофорезі кезінде осы параметрлерді басқарудың ең жақсы тәжірибелері.

3

Пекин Liuyi Biotechnology гель электрофорез өнімдері

Үлгі көлемі: сәйкестікті қамтамасыз ету

SDS-PAGE электрофорезін орындаған кезде үлгі көлемі нәтижелердің ажыратымдылығына айтарлықтай әсер ететін негізгі фактор болып табылады. Әдетте бір ұңғымаға 10 мкл жалпы ақуызды салу ұсынылады. Консистенцияны қамтамасыз ету және іргелес ұңғымалар арасында үлгінің диффузиясын болдырмау үшін кез келген бос ұңғымаға 1x тиеу буферінің тең көлемін жүктеу маңызды. Бұл сақтық шарасы ұңғыманы бос қалдырған жағдайда сынамалардың көрші жолақтарға таралуын болдырмауға көмектеседі.

Үлгілерді жүктемес бұрын әрқашан бір ұңғымаға молекулалық салмақ маркерін қосу арқылы бастаңыз. Бұл электрофорезден кейін ақуыз мөлшерін оңай анықтауға мүмкіндік береді.

1

Кернеуді басқару: жылдамдық пен рұқсатты теңестіру

Электрофорез кезінде қолданылатын кернеу сынамалардың гель арқылы өту жылдамдығына да, бөлу рұқсатына да тікелей әсер етеді. SDS-PAGE үшін шамамен 80 В төмен кернеуден бастаған жөн. Бұл бастапқы төмен кернеу үлгілердің баяу және біркелкі көшуіне мүмкіндік береді, оларды бөлгіш гельге кірген кезде өткір жолақта шоғырландырады.

Үлгілер бөлгіш гельге толығымен енгеннен кейін кернеуді 120 В дейін арттыруға болады. Бұл жоғары кернеу ақуыздардың молекулалық салмағына сәйкес тиімді бөлінуін қамтамасыз ете отырып, миграцияны жылдамдатады. Электрофорездің аяқталғанын көрсететін бромофенол көк бояғыш фронтының барысын бақылау өте маңызды. 10-12% концентрациясы бар гельдер үшін әдетте 80-90 минут жеткілікті; дегенмен, 15% гельдер үшін жұмыс уақытын сәл ұзарту қажет болуы мүмкін.

Уақытты басқару: қашан тоқтату керектігін білу

Уақыт - гельдік электрофорездегі тағы бір маңызды фактор. Гельді тым ұзақ немесе тым қысқа мерзімге пайдалану суоптималды бөлінуге әкелуі мүмкін. Бромфенол көк бояуының миграциясы пайдалы көрсеткіш болып табылады: ол гельдің түбіне жеткенде, әдетте жүгіруді тоқтату уақыты келеді. 10-12% сияқты стандартты гельдер үшін шамамен 80-90 минут электрофорез ұзақтығы әдетте жеткілікті. Жоғары пайыздық гельдер үшін, мысалы, 15%, ақуыздардың толық бөлінуін қамтамасыз ету үшін жұмыс уақытын ұзарту керек.

Буферді басқару: буферлерді қайта пайдалану және дайындау

Электрофорез буферін зертхананың нақты жағдайларына байланысты 1-2 рет қайта пайдалануға болады. Дегенмен, оңтайлы нәтижеге қол жеткізу үшін жаңа 10x буферді дайындап, оны қолданар алдында сұйылту ұсынылады. Бұл электрофорездің сенімді нәтижелеріне әкелетін буфердің тиімділігін сақтауды қамтамасыз етеді.

2

Пекин Liuyi Biotechnology гель электрофорез өнімдері

Үлгі көлемін, кернеуді және электрофорез уақытын мұқият бақылау арқылы гельдік электрофорез нәтижелерінің дәлдігі мен қайталану мүмкіндігін айтарлықтай жақсартуға болады. Зертханалық жұмысыңызда осы ең жақсы тәжірибелерді енгізу сізге нақтырақ және айқынырақ жолақтарға қол жеткізуге көмектеседі, бұл төменгі ағынды талдау үшін жақсы деректерге әкеледі.

Егер сізде гельдік электрофорез тәжірибесін оңтайландырудың жақсы әдістері болса, бізбен талқылауға қош келдіңіз!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) 50 жылдан астам уақыт бойы өзіміздің кәсіби техникалық командасымен және ғылыми-зерттеу орталығымен электрофорез құралдарын өндіруге маманданған. Бізде дизайннан инспекцияға, қоймаға, сондай-ақ маркетингтік қолдауға дейін сенімді және толық өндірістік желі бар. Біздің негізгі өнімдеріміз – электрофорез ұяшығы (бактер/камералар), электрофорезді қуат көзі, көк жарықдиодты трансиллюминатор, ультракүлгін сәулеленуді жарықтандырғыш, гельді кескіндеу және талдау жүйесі және т.б. Біз сондай-ақ ПТР құралы, құйынды араластырғыш және зертханаға арналған центрифуга сияқты зертханалық құралдарды жеткіземіз.

Егер сізде біздің өнімдерді сатып алу жоспары болса, бізге хабарласудан тартынбаңыз. Сіз бізге электрондық пошта арқылы хабарлама жібере аласыз[электрондық пошта қорғалған]немесе[электрондық пошта қорғалған], немесе +86 15810650221 нөміріне қоңырау шалыңыз немесе Whatsapp +86 15810650221 немесе Wechat: 15810650221 нөмірін қосыңыз.

Whatsapp немесе WeChat қолданбасына қосу үшін QR кодын сканерлеңіз.

2


Жіберу уақыты: 20 тамыз-2024 ж