Комета талдауы: ДНҚ зақымдануын және жөндеуін анықтауға арналған сезімтал әдіс

Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) - негізінен жеке жасушаларда ДНҚ зақымдануын және жөндеуін анықтау үшін қолданылатын сезімтал және жылдам әдіс. «Комета талдауы» атауы нәтижелерде пайда болатын комета тәрізді пішіннен шыққан: жасуша ядросы «басты» құрайды, ал зақымдалған ДНҚ фрагменттері қоныс аударып, кометаға ұқсайтын «құйрық» жасайды.

Принцип

Комета талдауының принципі электр өрісіндегі ДНҚ фрагменттерінің миграциясына негізделген. Зақымдалған немесе бөлшектенген ДНҚ анодқа қарай жылжып, кометаның «құйрығын» құрайды, ал бұзылмаған ДНҚ жасуша ядросында қалады. Құйрықтың ұзындығы мен қарқындылығы ДНҚ зақымдану дәрежесіне тура пропорционал.

Процедура

1. Жасушаны дайындау: Тексерілетін жасушалар балқу температурасы төмен агарозамен араласады және біркелкі қабат қалыптастыру үшін микроскоптың слайдтарына таралады.
2. Жасушаның лизисі: ДНҚ-ны экспозициялай отырып, жасуша мембранасы мен ядролық мембрананы жою үшін слайдтар лизис ерітіндісіне батырылады.
3. Электрофорез: Слайдтар сілтілі немесе бейтарап жағдайда электрофорез камерасына орналастырылады. Зақымдалған ДНҚ фрагменттері электр өрісінің әсерінен оң электродқа қарай жылжиды.
4. Бояу: Электрофорезден кейін слайдтар ДНҚ-ны визуализациялау үшін флуоресцентті бояумен (мысалы, этидий бромиді) боялады.
5. Микроскопиялық талдау: Флуоресцентті микроскопты немесе арнайы бағдарламалық құралды пайдалану арқылы комета пішіндері талданады және құйрықтың ұзындығы мен қарқындылығы сияқты параметрлер өлшенеді.

Биорендерден алынған сурет

Деректерді талдау

Комета талдауының нәтижелері бірнеше негізгі параметрлер негізінде бағаланады:

• Құйрық ұзындығы: ДНҚ зақымдану дәрежесін көрсететін ДНҚ тасымалдайтын қашықтықты білдіреді.
• Құйрық ДНҚ мазмұны: ДНҚ зақымдануының сандық өлшемі ретінде жиі қолданылатын құйрыққа ауысатын ДНҚ пайызы.
• Зәйтүн құйрық сәті (OTM): ДНҚ зақымдануының толық өлшемін қамтамасыз ету үшін құйрық ұзындығы мен құйрық ДНҚ мазмұнын біріктіреді.

Қолданбалар

1. Геноуыттылық зерттеулері: Comet Assay химиялық заттардың, препараттардың және радиацияның жасуша ДНҚ-сына әсерін бағалау үшін кеңінен қолданылады, бұл оны генотоксиктік тестілеудің негізгі құралына айналдырады.
2. Қоршаған орта токсикологиясы: Ол қоршаған ортаны ластаушы заттардың ағзалардың ДНҚ-сына әсерін талдауға көмектеседі, экожүйе қауіпсіздігі туралы түсінік береді.
3. Медициналық және клиникалық зерттеулер: Комета талдауы ДНҚ жөндеу механизмдерін, қатерлі ісіктерді және ДНҚ-ға байланысты басқа ауруларды зерттеуде қолданылады. Ол сондай-ақ радиотерапия және химиотерапия сияқты қатерлі ісік терапиясының ДНҚ-ға әсерін бағалайды.
4. Азық-түлік және ауыл шаруашылығы ғылымдары: Пестицидтердің, тағамдық қоспалардың және басқа заттардың қауіпсіздігін бағалау және жануарлар үлгілерінде олардың уытты әсерін зерттеу үшін қолданылады.

Артықшылықтары

• Жоғары сезімталдық: ДНҚ зақымдануының төмен деңгейін анықтауға қабілетті.
• Қарапайым операция: Техника қарапайым, сондықтан оны жоғары өнімді скринингке қолайлы етеді.
• Кең қолданба: Оны әртүрлі жасуша түрлеріне, соның ішінде жануарлар мен өсімдік жасушаларына қолдануға болады.
• Сандық көрсеткіштер: ДНҚ зақымдалуы туралы сапалы деректерді қамтамасыз ету кезінде, сандық талдау бағдарламалық жасақтамаға және кескінді талдау әдістеріне қатты сүйенеді.
• Эксперименттік шарттар: Нәтижелерге эксперименттік жағдайларды мұқият бақылауды қажет ететін электрофорез уақыты және рН сияқты факторлар әсер етуі мүмкін.

Шектеулер

Comet Assay биомедициналық зерттеулерде, қоршаған ортаны қорғау ғылымында және ДНҚ зақымдануын анықтауда және жөндеуде оның икемділігі мен жоғары сезімталдығына байланысты дәрілік заттарды әзірлеуде баға жетпес құрал болып табылады. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)кометалық талдау үшін көлденең электрофорез камерасын ұсынады. туралы талқылау үшін бізбен байланысуға қош келдіңізКомета талдауыхаттама.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) 50 жылдан астам уақыт бойы өзіміздің кәсіби техникалық командасымен және ғылыми-зерттеу орталығымен электрофорез құралдарын өндіруге маманданған. Бізде дизайннан инспекцияға, қоймаға, сондай-ақ маркетингтік қолдауға дейін сенімді және толық өндірістік желі бар. Біздің негізгі өнімдеріміз – электрофорез ұяшығы (бактер/камералар), электрофорезді қуат көзі, көк жарықдиодты трансиллюминатор, ультракүлгін сәулеленуді жарықтандырғыш, гельді кескіндеу және талдау жүйесі және т.б. Біз сондай-ақ ПТР құралы, құйынды араластырғыш және зертханаға арналған центрифуга сияқты зертханалық құралдарды жеткіземіз.

Егер сізде біздің өнімдерді сатып алу жоспары болса, бізге хабарласудан тартынбаңыз. Сіз бізге электрондық пошта арқылы хабарлама жібере аласыз[электрондық пошта қорғалған]немесе[электрондық пошта қорғалған], немесе +86 15810650221 нөміріне қоңырау шалыңыз немесе Whatsapp +86 15810650221 немесе Wechat: 15810650221 нөмірін қосыңыз.

Whatsapp немесе WeChat қолданбасына қосу үшін QR кодын сканерлеңіз.