Агарозды гельдік электрофорездің негізгі әдістері(2)

Үлгіні дайындау жәнеЖүктелуде

Көп жағдайда гельді қабаттастырмай үздіксіз буферлік жүйені қолдануға байланысты үлгілер тиісті концентрацияға және шағын көлемге ие болуы керек. a пайдаланыңызтамшуыражыратымдылықтың айтарлықтай төмендеуіне жол бермеу үшін ұңғымаға 5-10 мкг болатын үлгіні баяу қосу. Қашанүлгіні жүктеу, қуат көзі өшірілген болуы керек. Үлгінің тығыздығын арттыру, үлгіні концентрлеу және диффузияны болдырмау үшін индикаторлық бояу (0,025% бромофенол көк немесе қызғылт сары) және сахароза (10-15%) немесе глицерин (5-10%) болуы керек. Дегенмен, кейде сахароза немесе глицерин электрофорез нәтижелерінде U-тәрізді жолақтарды тудыруы мүмкін, оны 2,5% Фиколл (поливинилпирролидон) қолдану арқылы болдырмауға болады.

1

Электрофорез

Электрофорезге арналған кернеу 5-15 В/см, әдетте шамамен 10 В/см. Үлкен молекулаларды бөлу үшін кернеу төмен болуы керек, әдетте 5 В/см-ден аспауы керек.

2

Бояу

Флуоресцентті бояғыш этидиум бромиді (EB) әдетте агароздық гельдегі ДНҚ жолақтарын байқау үшін бояу үшін қолданылады. EB ДНҚ молекулаларының негізгі жұптары арасына еніп, EB-нің ДНҚ-мен байланысуына себепші болады. ДНҚ-ның 260 нм ультракүлгін сәулесін жұтуы EB-ге ауысады, ал байланысқан ЭБ көрінетін жарық спектрінің қызыл-қызғылт сары аймағында 590 нм флуоресценция шығарады. Гельді 1 ммоль/л MgSO4 ерітіндісінде 1 сағат бойы бояу ДНҚ-ның аз мөлшерін анықтауды жеңілдете отырып, байланыспаған EB-ден туындаған фондық флуоресценцияны азайтуы мүмкін.

EB бояуының бірнеше артықшылығы бар: қолдану оңай, нуклеин қышқылдарын бұзбайды, сезімталдығы жоғары, ДНҚ-ны да, РНҚ-ны да бояй алады. EB үлгіге қосуға және кез келген уақытта ультракүлгін сіңіру арқылы бақылауға болады. Бояғаннан кейін EB n-бутанолмен экстракциялау арқылы жойылуы мүмкін.

Дегенмен, EB бояуы күшті мутаген болып табылады және өңдеу кезінде полиэтилен қолғап кию сияқты сақтық шараларын сақтау керек. Акридин апельсині де жиі қолданылатын бояғыш болып табылады, өйткені ол бір жіпті және қос тізбекті нуклеин қышқылдарын (ДНҚ, РНҚ) ажырата алады. Ол екі тізбекті нуклеин қышқылдары үшін жасыл флуоресценцияны (530 нм) және бір тізбекті нуклеин қышқылдары үшін қызыл флуоресценцияны (640 нм) көрсетеді. Сонымен қатар, бояу үшін метилен көк, метилен жасыл және хинолин В сияқты басқа бояғыштарды пайдалануға болады.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) 50 жылдан астам уақыт бойы өзіміздің кәсіби техникалық командасымен және ғылыми-зерттеу орталығымен электрофорез құралдарын өндіруге маманданған. Бізде дизайннан инспекцияға, қоймаға, сондай-ақ маркетингтік қолдауға дейін сенімді және толық өндірістік желі бар. Біздің негізгі өнімдеріміз: электрофорез ұяшығы (бактер/камералар), электрофорезді қуат көзі, көк жарық диодты трансиллюминатор, ультракүлгін сәулелендіргіш, гельдік кескін және талдау жүйесі т.б.

3

Біз қазір серіктестерді іздейміз, OEM электрофорез цистернасы да, дистрибьюторлар да құпталады.

Егер сізде біздің өнімдерді сатып алу жоспары болса, бізге хабарласудан тартынбаңыз. Сіз бізге электрондық пошта арқылы хабарлама жібере аласыз[электрондық пошта қорғалған]немесе[электрондық пошта қорғалған], немесе +86 15810650221 нөміріне қоңырау шалыңыз немесе Whatsapp +86 15810650221 немесе Wechat: 15810650221 нөмірін қосыңыз.

Whatsapp немесе WeChat қолданбасына қосу үшін QR кодын сканерлеңіз.

2


Жіберу уақыты: 20 желтоқсан 2023 ж