1. Классификация
Гель электрофорезі тік түрлерге (бағаналық гельдер мен плита гельдерін қоса) және көлденең түрлерге (негізінен плита гельдері) бөлінеді (6-18-сурет). Жалпы алғанда, тік бөлу көлденеңінен сәл артық, бірақ көлденең гельді дайындаудың кем дегенде төрт артықшылығы бар: бүкіл гельдің астында тірек бар, бұл төмен концентрациялы агарозаны қолдануға мүмкіндік береді; әртүрлі спецификациядағы агарозды гельдік пластиналарды дайындауға болады; гельді дайындау және үлгіні жүктеу ыңғайлырақ; электрофорез камерасын салу оңай және үнемді. Көлденең электрофорез электрофорез буферінің бетінен шамамен 1 мм төмен толығымен суға батырылған агароз гелі пластинасы арқылы орындалатындықтан, оны су асты электрофорез деп те атайды.
Агарозды гель электрофорезіне арналған DYCP-31DN электрофорез цистернасы
2. Буферлік жүйе
Нуклеин қышқылын бөлуде көптеген жүйелер үздіксіз жүйелерді қабылдайды. Жиі қолданылатын электрофорез буферлеріне TBE (0,08моль/л Tris·HCl, рН 8,5, 0,08моль/л бор қышқылы, 0,0024моль/л ЭДТА) буфері және THE (0,04моль/л Tris·HCl, рН 7,8, 0,02моль/л) жатады. натрий ацетаты, 0,0018моль/л ЭДТА) буфер. Бұл буферлер әдетте 10x ерітінді түрінде дайындалады және пайдаланған кезде қажетті концентрацияға дейін сұйылтылады. Агароздық гельдегі сызықтық және дөңгелек ДНҚ-ның көшу жылдамдығы қолданылатын буферге байланысты өзгереді. THE буферінде сызықтық ДНҚ-ның көшу жылдамдығы дөңгелек ДНҚ-ға қарағанда жоғары, ал TBE буферінде керісінше.
3. Агароза гелін дайындау
(1) Көлденең агароза гелін дайындау
(a) 1x электрофорез буферінің көмегімен агароз гелінің қажетті концентрациясын дайындаңыз.
(b) Қайнаған су моншасында, магнитті араластырғышта немесе микротолқынды пеште ерітуді аяқтау үшін агарозды қыздырыңыз. Агароз ерітіндісін 55°С дейін суытып, 0,5 мкг/мл соңғы концентрацияға дейін этидий бромиді (ЭБ) бояуын қосыңыз.
(c) Шыны немесе акрил пластиналардың шеттерін агарозды гельдің аз мөлшерімен жабыңыз, тарақты қосыңыз және тарақ тістерін пластинадан шамамен 0,5~1,0 мм жоғары қойыңыз.
(d) Балқытылған агароз гелі ерітіндісін ауа көпіршіктерінің енуіне жол бермей, шыны немесе акрил пластинасының қалыпына үздіксіз құйыңыз (қалыңдығы ДНҚ үлгісінің көлеміне байланысты). Бөлме температурасында табиғи түрде қатып қалсын.
(e) Толық қатқаннан кейін тарақты абайлап алыңыз. Гельдік пластинаның электрофорез буферінің бетінен шамамен 1 мм төмен батырылғанына көз жеткізіп, электрофорез буферінің тиісті мөлшерін гельдік резервуарға қосыңыз.
(2) Вертикаль агароза гелін дайындау
(a) Этанолмен жуу арқылы шыны табақтардағы майды немесе қалдықты кетіріңіз.
(b) Алдыңғы және артқы бөгеттердің арасына аралық тақталарды орналастырыңыз, аралық тақталардың жиектерін алдыңғы және артқы бөгеттермен туралаңыз және оларды қысқыштармен бекітіңіз.
(c) Гель құю камерасының төменгі жағында 1 см биіктіктегі агарозды тығынды қалыптастыру үшін аралық тақталардың шеттерінің арасына 1x буферге 2% агароза қосыңыз.
(d) 1x буферде дайындалған қажетті концентрациядағы балқытылған агарозды гельді гель камерасына жоғарғы жағынан 1 см төмен құйыңыз.
(e) Тарақ тістерінің астындағы ауа көпіршіктерін ұстамай, тарақты салыңыз. Кейде агарозды гельді салқындату кезінде тарақ тістерінде әжімдер пайда болуы мүмкін; мұндай жағдайларда оны қатайту үшін жоғарғы жағына еріген агарозаны қосыңыз.
(f) Тарақты алыңыз. Жүктеу ұяшығындағы буфердің ағып кетуіне жол бермеу үшін агароздық гель тақтасы мен электрофорез камерасы арасындағы байланысты 2% агарозамен жабыңыз және буфердің қажетті мөлшерін қосыңыз.
(g) Гель камерасына 1x электрофорез буферін қосыңыз.
(h) ДНҚ үлгілерін буфер астындағы агароздық гельге мұқият жүктеңіз.
Агарозды гель электрофорезі туралы негізгі білім туралы қосымша ақпаратты келесі аптада бөлісеміз. Бұл ақпарат тәжірибеңізге пайдалы болуын тілейміз.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) 50 жылдан астам уақыт бойы өзіміздің кәсіби техникалық командасымен және ғылыми-зерттеу орталығымен электрофорез құралдарын өндіруге маманданған. Бізде дизайннан инспекцияға, қоймаға, сондай-ақ маркетингтік қолдауға дейін сенімді және толық өндірістік желі бар. Біздің негізгі өнімдеріміз: электрофорез ұяшығы (бактер/камералар), электрофорезді қуат көзі, көк жарық диодты трансиллюминатор, ультракүлгін сәулелендіргіш, гельдік кескін және талдау жүйесі т.б.
Біз қазір серіктестерді іздейміз, OEM электрофорез цистернасы да, дистрибьюторлар да құпталады.
Егер сізде біздің өнімдерді сатып алу жоспары болса, бізге хабарласудан тартынбаңыз. Сіз бізге электрондық пошта арқылы хабарлама жібере аласыз[электрондық пошта қорғалған]немесе[электрондық пошта қорғалған], немесе +86 15810650221 нөміріне қоңырау шалыңыз немесе Whatsapp +86 15810650221 немесе Wechat: 15810650221 нөмірін қосыңыз.
Whatsapp немесе WeChat қолданбасына қосу үшін QR кодын сканерлеңіз.
Жіберу уақыты: 07 желтоқсан 2023 ж